Сухая среда Гибрис-1-СНО на 2 л, ПанЭко
Сухая среда Гибрис-1-СНО на 2 л, ПанЭко
Сухая среда «Гибрис-1-СНО» (СС741) относится к обогащённым бессывороточным средам определённого состава и предназначена для культивирования различных линий СНО в условиях суспензионной культуры.
Выпускается в порошке, что позволяет оптимизировать условия транспортировки, хранения и рационального использования рабочего объёма среды.
При подобранных условиях рекомендуется использовать высокие посадочные концентрации культуры*, что позволяет достигнуть высокой плотности клеток для адаптированной суспензионной биореакторной культуры, даже без введения базовых трофических подпиток.
*Используя стартовую концентрацию 4,0-10,0 * 105 кл/мл можно получить максимальные плотности культуры CHO-S уже на 3-4 сутки, в условиях суспензионной культуры. – Для адаптированной линии CHO-S на 3-4 сутки культивирования систематически достигались плотности 1,0 – 1,6*107 кл/мл, без введения дополнительных подпиток.
Среда может быть использована для адаптации сывороточных культур СНО к условиям бессывороточной суспензионной культуры.
- Сухая среда представляет собой однородный порошок желто-кремового цвета.
- Среда содержит углеводы, аминокислоты, витамины ионы металлов и другие питательные компоненты.
- Не содержит антибиотиков, глутамина, HEPES и фенолового красного.
- Среда не содержит альбумина и продуктов гидролиза белков животной или растительной природы в качестве обогатителей.
Упаковка: порошок, для приготовления 2, 10 и 50 л готовой среды.
Срок годности: 1 год.
Условия хранения: Хранить при температуре от +2 С до +8 С в защищённом от света месте. Не допускать попадания влаги внутрь упаковки.
Назначение: Среда "ГибриС-1-CHO" предназначена для суспензионного культивирования и продукции рекомбинантных белков клетками генноинженерных линий CHO.
Способ применения:
Необходимое количество сухой среды (из расчёта 22,5 г/л) растворяют в 90% (от финального объёма среды) ультраочищенной дистиллированной воды или воды для инъекций, при температуре 20-30оС путём механического перемешивания. После полного растворения среды (20 – 30 минут) необходимо добавить соответствующее количество бикарбоната натрия (исходя из 2,25 г/л cухого NaHCO3). Спустя 15-20 минут (при постоянном перемешивании) требуется скорректировать рН – используя 3М раствор соляной кислоты довести рН до ~ 7,3. Спустя ~ 15 минут, при непрерывном перемешивании, проверить рН (показатель не должен превышать 7.4, при необходимости скорректировать, используя 3М раствор HCl) и довести объём среды до 100 %. Произвести стерилизующую фильтрацию полученной среды «Гибрис-1-СНО» через 0,22мкм PES-фильтр.
Осмолярность готовой среды «Гибрис-1-СНО» должна составлять 280-320 mOsm/kg, при рН 7,2-7,4.
Перед использованием в среду необходимо ввести источник глутамина (рекомендован аланил-глутамин) в концентрации 4-6мМ, при необходимости – антибиотики, предшественники нуклеотидов и/или необходимые минорные компоненты.